Laboratorium klinik sebagai subsistem
pelayanan kesehatan menempati posisi penting dalam diagnosis invitro.
Setidaknya terdapat 5 alasan penting mengapa pemeriksaan laboratorium
diperlukan, yaitu : skrining, diagnosis, pemantauan progresifitas
penyakit, monitor pengobatan dan prognosis penyakit. Oleh karena itu
setiap laboratorium harus dapat memberikan data hasil tes yang teliti,
cepat dan tepat.
Dalam
proses pengendalian mutu laboratorium dikenal ada tiga tahapan penting,
yaitu tahap pra analitik, analitik dan pasca analitik. Pada umumnya
yang sering sering diawasi dalam pengendalian mutu hanya tahap analitik
dan pasca analitik yang lebih cenderung kepada urusan administrasi,
sedangkan proses pra analitik kurang mendapat perhatian.
Kesalahan
pada proses pra-analitik dapat memberikan kontribusi sekitar 61% dari
total kesalahan laboratorium, sementara kesalahan analitik 25%, dan
kesalahan pasca analitik 14%. Proses pra-analitik dibagi menjadi dua
kelompok, yaitu : pra-analitik ekstra laboratorium dan pra-analitik
intra laboratorium. Proses-proses tersebut meliputi persiapan pasien,
pengambilan spesimen, pengiriman spesimen ke laboratorium, penanganan
spesimen, dan penyimpanan spesimen.
PERSIAPAN PASIEN
Persiapan
pasien dimulai saat seorang dokter merencanakan pemeriksaan
laboratorium bagi pasien. Dokter dibantu oleh paramedis diharapkan dapat
memberikan informasi mengenai tindakan apa yang akan dilakukan, manfaat
dari tindakan itu, dan persyaratan apa yang harus dilakukan oleh
pasien. Informasi yang diberikan harus jelas agar tidak menimbulkan
ketakutan atau persepsi yang keliru bagi pasien. Pemilihan jenis tes
yang kurang tepat atau tidak sesuai dengan kondisi klinis pasien akan
menghasilkan interpretasi yang berbeda. Ketaatan pasien akan instruksi
yang diberikan oleh dokter atau paramedis sangat berpengaruh terhadap
hasil laboratorium; tidak diikutinya instruksi yang diberikan akan
memberikan penilaian hasil laboratorium yang tidak tepat. Hal yang sama
juga dapat terjadi bila keluarga pasien yang merawat tidak mengikuti
instruksi tersebut dengan baik.
Ada beberapa sumber kesalahan
yang kurang terkontrol dari proses pra-analitik yang dapat mempengaruhi
keandalan pengujian laboratorium, tapi yang hampir tidak dapat
diidentifikasi oleh staf laboratorium. Ini terutama mencakup variabel
fisik pasien, seperti latihan fisik, puasa, diet, stres, efek posisi,
menstruasi, kehamilan, gaya hidup (konsumsi alkohol, rokok, kopi, obat
adiktif), usia, jenis kelamin, variasi diurnal, pasca transfusi, pasca
donasi, pasca operasi, ketinggian. Karena variabel tersebut memiliki
pengaruh yang kuat terhadap beberapa variabel biokimia dan hematologi,
maka gaya hidup individu dan ritme biologis pasien harus selalu
dipertimbangkan sebelum pengambilan sampel.
PERSIAPAN PENGUMPULAN SPESIMEN
Spesimen yang akan diperiksa laboratorium haruslah memenuhi persyaratan sebagai berikut :
- Jenisnya sesuai jenis pemeriksaan
- Kondisi baik : tidak lisis, segar/tidak kadaluwarsa, tidak berubah warna, tidak berubah bentuk, steril (untuk kultur kuman)
- Pemakaian antikoagulan atau pengawet tepat
- Ditampung dalam wadah yang memenuhi syarat
- Identitas benar sesuai dengan data pasien
Sebelum
pengambilan spesimen, periksa form permintaan laboratorium. Identitas
pasien harus ditulis dengan benar (nama, umur, jenis kelamin, nomor
rekam medis, dsb) disertai diagnosis atau keterangan klinis. Periksa
apakah identitas telah ditulis dengan benar sesuai dengan pasien yang
akan diambil spesimen.
Tanyakan persiapan yang telah dilakukan
oleh pasien, misalnya diet, puasa. Tanyakan juga mengenai obat-obatan
yang dikonsumsi, minum alkohol, merokok, dsb. Catat apabila pasien telah
mengkonsumsi obat-obatan tertentu, merokok, minum alkohol, pasca
transfusi, dsb. Catatan ini nantinya harus disertakan pada lembar hasil
laboratorium.
1. Peralatan
Peralatan yang digunakan harus memenuhi persyaratan sebagai berikut :
- tidak mengandung deterjen atau bahan kimia
- terbuat dari bahan yang tidak mengubah zat-zat dalam spesimen
- sekali pakai buang (disposable)
- steril (terutama untuk kultur kuman)
- tidak retak/pecah, mudah dibuka dan ditutup rapat, ukuran sesuai dengan volume spesimen
2. Antikoagulan
Antikoagulan
adalah bahan kimia yang digunakan untuk mencegah pembekuan darah. Jenis
antikoagulan yang dipergunakan harus disesuaikan dengan jenis
pemeriksaan yang diminta. Volume darah yang ditambahkan juga harus
tepat.
3. Pemilihan Lokasi Pengambilan Spesimen
Tentukan lokasi pengambilan spesimen sesuai dengan jenis spesimen yang diperlukan, seperti :
- Darah
vena umumnya diambil dari vena lengan (median cubiti, vena cephalic,
atau vena basilic). Tempat pengambilan tidak boleh pada jalur infus atau
transfusi, bekas luka, hematoma, oedema, canula, fistula
- Darah
arteri umumnya diambil dari arteri radialis (pergelangan tangan),
arteri brachialis (lengan), atau arteri femoralis (lipat paha).
- Darah
kapiler umumnya diambil dari ujung jari tengah atau jari manis tangan
bagian tepi atau pada daerah tumit 1/3 bagian tepi telapak kaki pada
bayi. Tempat yang dipilih untuk pengambilan tidak boleh memperlihatkan
gangguan peredaran darah seperti sianosis atau pucat.
- Spesimen untuk pemeriksaan biakan kuman diambil dari tempat yang sedang mengalami infeksi, kecuali darah dan cairan otak.
4. Waktu Pengambilan
Penentuan waktu pengambilan spesimen penting untuk diperhatikan.
- Umumnya pengambilan dilakukan pada waktu pagi (ideal)
- Spesimen untuk kultur kuman diambil sebelum pemberian antibiotik
- Spesimen untuk pemeriksaan GO diambil 2 jam setelah buang air yang terakhir
- Spesimen untuk malaria diambil pada waktu demam
- Spesimen untuk mikrofilaria diambil pada tengah malam
- Spesimen dahak untuk pemeriksaan BTA diambil pagi hari setelah bangun tidur
- Spesimen darah untuk pemeriksaan profil besi diambil pada pagi hari dan setelah puasa 10-12 jam
PENGAMBILAN SPESIMEN
Hal-hal yang harus diperhatikan pada pengambilan spesimen adalah :
- Tehnik atau cara pengambilan. Pengambilan spesimen harus dilakukan dengan benar sesuai dengan standard operating procedure (SOP) yang ada.
- Cara menampung spesimen dalam wadah/penampung.
- Seluruh
sampel harus masuk ke dalam wadah (sesuai kapasitas), jangan ada yang
menempel pada bagian luar tabung untuk menghindari bahaya infeksi.
- Wadah harus dapat ditutup rapat dan diletakkan dalam posisi berdiri untuk mencegah spesimen tumpah.
- Memindahkan spesimen darah dari syringe harus memperhatikan hal-hal seperti berikut :
- Darah harus segera dimasukkan dalam tabung setelah sampling.
- Lepaskan jarum, alirkan darah lewat dinding tabung perlahan-lahan agar tidak terjadi hemolisis.
- Untuk pemeriksaan kultur kuman dan sensitivitas, pemindahan sampel ke dalam media dilakukan dengan cara aseptik
- Pastikan jenis antikoagulan dan volume darah yang ditambahkan tidak keliru.
- Homogenisasi
segera darah yang menggunakan antikoagulan dengan lembut
perlahan-lahan. Jangan mengkocok tabung keras-keras agar tidak
hemolisis.
- Menampung spesimen urin
- Sediakan wadah yang bersih, kering, tidak terkontaminasi oleh bahan apapun, mudah dibuka, mudah ditutup, dan bermulut lebar
- Sebaiknya pasien diinstruksikan membuang urine yang mula-mula keluar sebelum mengumpulkan urine untuk diperiksa.
- Untuk mendapatkan specimen clean catch diperlukan cara pembersihan lebih sempurna :
- Mulut uretra dibersihkan dengan sabun dan kemudian membilasnya sampai bersih.
- Penderita wanita harus lebih dulu membersihkan labia minora, lalu harus merenggangkannya pada waktu kencing.
- Perempuan
yang sedang menstruasi atau yang mengeluarkan banyak secret vagina,
sebaiknya memasukkan tampon sebelum mengumpulkan specimen.
- Bagian
luar wadah urine harus dibilas dan dikeringkan setelah spesimen didapat
dan keterangan tentang pemeriksaan harus jelas dicantumkan.
- Menampung spesimen tinja
- Sampel
tinja sebaiknya berasal dari defekasi spontan. Jika sangat diperlukan,
sampel tinja juga dapat diperoleh dari pemeriksaan colok dubur.
- Masukkan
sampel ke dalam wadah yang bersih, kering, tidak terkontaminasi oleh
bahan apapun, dapat ditutup rapat, dapat dibuka dengan mudah dan
bermulut lebar.
- Menampung spesimen dahakPenting untuk mendapatkan sekret bronkial dan bukan ludah atau sekret hidung.
- Sediakan
wadah yang bersih, kering, tidak terkontaminasi oleh bahan apapun,
mudah dibuka, mudah ditutup, dan bermulut lebar. Untuk pewarnaan BTA,
jangan gunakan wadah yang mengandung bercak lilin atau minyak, sebab zat
ini dapat dilihat sebagai bintik-bintik tahan asam dan dapat
menyulitkan penafsiran.
- Sebelum pengambilan spesimen, penderita
diminta berkumur dengan air, bila mungkin gosok gigi terlebih dulu. Bila
memakai gigi palsu, sebaiknya dilepas dulu.
- Pada saat pengambilan spesimen, penderita berdiri tegak atau duduk tegak
- Penderita
diminta untuk menarik nafas dalam 2 – 3 kali kemudian keluarkan nafas
bersamaan dengan batuk yang kuat dan berulang kali sampai dahak keluar.
- Dahak yang dikeluarkan langsung ditampung dalam wadah dengan cara mendekatkan wadah ke mulut.
- Amati keadaan dahak. Dahak yang memenuhi syarat pemeriksaan akan tampak kental purulen dengan volume cukup ( 3 – 5 ml )
- Tutup wadah dengan rapat untuk menghindari kontaminasi dari udara dan secepatnya dikirim ke laboratorium.
Sumber-sumber kesalahan pada pengambilan spesimen darah :
- Pemasangan turniquet terlalu lama dapat menyebabkan :
- Protein (termasuk enzim) , Ca2+, laktat , fosfat, dan Mg2+ meningkat
- pH menurun, hemokonsentrasi
- PPT dan APTT mungkin memendek karena pelepasan tromboplastin jaringan ke dalam sirkulasi darah
- Pemompaan menyebabkan kalium, laktat, glukosa, dan Mg2+ meningkat, sedangkan pH menurun
- Pengambilan darah terlalu lama (tidak sekali tusuk kena) dapat menyebabkan :
- trombosit dan fibrinogen menurun; PPT dan APTT memanjang
- kalium, LDH dan SGPT/ALT meningkat
- Pengambilan darah pada jalur infus dapat menyebabkan :
- natrium meningkat pada infus saline
- kalium meningkat pada infus KCl
- glukosa meningkat pada infus dextrose
- PPT, APTT memanjang pada infus heparine.
- kreatinin, fosfat, LDH, SGOT, SGPT, Hb, Hmt, lekosit, trombosit, eritrosit menurun pada semua jenis infus
- Homogenisasi
darah dengan antikoagulan yang tidak sempurna atau keterlambatan
homogenisasi menyebabkan terbentuknya bekuan darah.
- Hemolisis dapat menyebabkan peningkatan K+, Mg2+, fosfat, aminotransferase, LDH, fosfatase asam total
IDENTIFIKASI SPESIMEN
Pemberian
identitas pasien dan atau spesimen adalah tahapan yang harus dilakukan
karena merupakan hal yang sangat penting. Pemberian identitas meliputi
pengisian formulir permintaan pemeriksaan laboratorium dan pemberian
label pada wadah spesimen. Keduanya harus cocok sama. Pemberian
identitas ini setidaknya memuat nama pasien, nomor ID atau nomor rekam
medis serta tanggal pengambilan. Kesalahan pemberian identitas dapat
merugikan.
Untuk spesimen berisiko tinggi (HIV, Hepatitis) sebaiknya disertai tanda khusus pada label dan formulir permintaan laboratorium.
PENGIRIMAN SPESIMEN KE LABORATORIUM
Spesimen yang telah dikumpulkan harus segera dikirim ke laboratorium.
- Sebelum
mengirim spesimen ke laboratorium, pastikan bahwa spesimen telah
memenuhi persyaratan seperti yang tertera dalam persyaratan
masing-masing pemeriksaan.
- Apabila spesimen tidak memenuhi syarat agar diambil / dikirim ulang.
- Pengiriman
spesimen disertai formulir permintaan yang diisi data yang lengkap.
Pastikan bahwa identitas pasien pada label dan formulir permintaan sudah
sama.
- Secepatnya spesimen dikirim ke
laboratorium. Penundaan pengiriman spesimen ke laboratorium dapat
dilakukan selambat-lambatnya 2 jam setelah pengambilan spesimen.
Penundaan terlalu lama akan menyebabkan perubahan fisik dan kimiawi yang
dapat menjadi sumber kesalahan dalam pemeriksaan, seperti :
- Penurunan kadar natrium ( Na+ ), glukosa darah, angka lekosit, angka trombosit.
- Perubahan morfologi sel darah pada pemeriksaan mikroskopik
- PPT / APTT memanjang.
- Peningkatan kadar kalium ( K+ ), phosphate, LDH, SGPT.
- Lisisnya sel pada sample LCS, transudat, eksudat.
- Perkembangbiakan bakteri
- Penundaan pengiriman sampel urine :
- Unsur-unsur
yang berbentuk dalam urine (sediment), terutama sel-sel eritrosit,
lekosit, sel epitel dan silinder mulai rusak dalam waktu 2 jam.
- Urat dan fosfat yang semula larut akan mengendap, sehingga menyulitkan pemeriksaan mikroskopik atas unsur-unsur lain.
- Bilirubin dan urobilinogen teroksidasi bila berkepanjangan terkena sinar matahari.
- Bakteri-bakteri akan berkembang biak yang akan menyebabkan terganggunya pemeriksaan bakteriologis dan pH.
- Jamur akan berkembang biak
- Kadar
glukosa mungkin menurun dan kalau semula ada, zat-zat keton dapat
menghilang.Apabila akan ditunda pengirimannya dalam waktu yang lama
spesimen harus disimpan dalam refrigerator/almari es pada suhu 2 – 8 oC
paling lama 8 jam.
- Pengiriman
sample sebaiknya menggunakan wadah khusus, misalnya berupa kotak atau
tas khusus yang tebuat dari bahan plastik, gabus (styro-foam) yang dapat
ditutup rapat dan mudah dibawa.
PENANGANAN SPESIMEN
- Identifikasi dan registrasi spesimen
- Seluruh spesimen harus diperlakukan sebagai bahan infeksius
- Patuhi cara pengambilan spesimen dan pengisian tabung yang benar
- Gunakan sentrifus yang terkalibrasi
- Segera pisahkan plasma atau serum dari darah dalam tabung lain, tempeli label
- Segera distribusikan spesimen ke ruang pemeriksaan
PENYIMPANAN SPESIMEN
- Penyimpanan spesimen dilakukan jika pemeriksaan ditunda atau spesimen akan dikirim ke laboratorium lain
- Lama penyimpanan harus memperhatikan, jenis pemeriksaan, wadah dan stabilitasnya
- Hindari penyimpanan whole blood di refrigerator
- Sampel yang dicairkan (setelah dibekukan) harus dibolak-balik beberapa kali dan terlarut sempurna. Hindari terjadinya busa.
- Simpan sampel untuk keperluan pemeriksaan konfirmasi / pengulangan
- Menyimpan
spesimen dalam lemari es dengan suhu 2-8ºC, suhu kamar, suhu -20ºC,
-70ºC atau -120ºC jangan sampai terjadi beku ulang.
- Untuk
jenis pemeriksaan yang menggunakan spesimen plasma atau serum, maka
plasma atau serum dipisahkan dulu baru kemudian disimpan.
- Memberi bahan pengawet pada spesimen
- Menyimpan formulir permintaan lab di tempat tersendiri
Waktu penyimpanan spesimen dan suhu yang disarankan :
- Kimia klinik : 1 minggu dalam referigerator
- Imunologi : 1 minggu dalam referigerator
- Hematologi : 2 hari pada suhu kamar
- Koagulasi : 1 hari dalam referigerator
- Toksikologi : 6 minggu dalam referigerator
- Blood grouping : 1 minggu dalam referigerator
Siapa yang Terlibat Dalam Proses Pra-Analitik?
Selalu
ada beberapa orang yang terlibat dalam proses pra-analitik, yaitu
pasien, dokter, paramedis/perawat, petugas layanan transportasi, analis
dan dokter laboratorium; mereka semua berbagi tanggung jawab terhadap
mutu bahan spesimen dan harus memahami pentingnya tahap pra-analtik,
serta mengenali kemungkinan penyebab kesalahan dan konsekuensi mereka
untuk hasil pemeriksaan.
Komunikasi antara dokter,
paramedis/perawat, petugas layanan transportasi, analis dan dokter
laboratorium harus selalu ditingkatkan dalam bentuk komunikasi langsung,
telepon, atau media lainnya. Lebih baik kalau laboratorium dapat
membuat pedoman atau semacam SOP mengenai pengumpulan spesimen untuk
penggunaan oleh bagian lain. Pedoman tersebut harus ditinjau ulang oleh
supervisor laboratorium. Laboratorium juga perlu menetapkan prosedur
untuk penanganan spesimen dan prosedur untuk manajemen spesimen
(penerimaan atau penolakan spesimen).